TAE buffer

TAE -buffer er en løsning som brukes i agaroseelektroforese for separasjon av nukleinsyrer som DNA og RNA [1] . Den er sammensatt av en løsning av Tris-acetat, vanligvis ved pH 8,0, og EDTA som sekvestrerer de toverdige kationene. TAE-bufferen har en lavere bufferkraft enn TBE-bufferen som derfor kan gjenbrukes mindre enn den andre bufferen og må ofte erstattes hvis det utføres mange elektroforeser. Det er imidlertid viktig å påpeke at dobbelttrådet DNA løper raskere i TAE

Forberedelse

For 1 liter TAE 50x buffer bruk:

For å fremstille 0,5 M Na 2 EDTA (pH 8,0) tilsett 186,1 g dinatriumetylendiamintetraacetat i ddH 2 O opp til 800 ml H 2 O. Rist kraftig. Sett pH til 8,0 med NaOH (ca. 20 g NaOH). Fyll opp til volum (1L) med ddH 2 O. Steriliser i autoklav. Advarsel: EDTA dinatriumsalt løses ikke før løsningen har en pH på ca. 8,0 ved å tilsette NaOH.

Merknader

  1. ^ Ogden, RC, og Adams, DA, Elektroforese i agarose- og akrylamidgeler. Methods Enzymol., 152, 61-87 (1987)

Relaterte elementer